Pievienot darbus Atzīmētie0
Darbs ir veiksmīgi atzīmēts!

Atzīmētie darbi

Skatītie0

Skatītie darbi

Grozs0
Darbs ir sekmīgi pievienots grozam!

Grozs

Reģistrēties

interneta bibliotēka
Atlants.lv bibliotēka

Izdevīgi: šodien akcijas cena!

Parastā cena:
5,99
Ietaupījums:
0,72 (12%)
Cena ar atlaidi*:
5,27
Pirkt
Identifikators:640500
Vērtējums:
Publicēts: 20.12.2012.
Valoda: Latviešu
Līmenis: Augstskolas
Literatūras saraksts: Nav
Atsauces: Nav
SatursAizvērt
Nr. Sadaļas nosaukums  Lpp.
1.  LITERATŪRAS APSKATS    4
1.1.  Ģenētiskais kods    4
1.1.1.  Ģenētikā koda īpašības    4
1.2.  DNS izdalīšana    6
1.2.1.  DNS izdalīšanas metodes    7
1.2.2.  DNS attīrīšanas metodes    7
1.3.  DNS izdalīšana/nogulsnēšana    9
1.3.1.  Hromatogrāfija    9
1.3.2.  Centrifugēšana    9
1.3.3.  Afīnā sadalīšana    10
1.4.  DNS izdalīšana ar CTAB izmantošanu: DNS līze, izdalīšana un nogūlsnēšana    11
1.4.1.  Šūnu membrānas līze    12
1.4.2.  DNS izdalīšana ar CTAB metodi    12
1.4.3.  DNS nogulsnēšana    12
1.5.  Nepieciešamais aprīkojums, reaktīvi un DNS izdalīšanas procedūra    13
1.5.1.  Nepieciešamais aprīkojums DNS izdalīšanai    13
1.5.2.  Nepieciešamie reaktīvi DNS izdalīšanai    13
1.5.3.  DNS izdalīšanas procedūra    15
Darba fragmentsAizvērt

1.4.2. DNS izdalīšana ar CTAB metodi
Šajā etapā polisaharīdi, fenolie savienojumi, olbaltumvielas un citi šūnu līzes komponenti, kuri atrodas ūdens šķīdumā, atdalās no nukleīnskābju CTAB kompleksa.
Polisaharīdu kā arī fenolo savienojumu atdalīšana īpaši svarīga, jo tie spēj inhibēt ievērojamu skaitu fermentīvo reakciju. Pie zemas sāļu koncentrācijas (<0,5 M NaCl) nukleīnskābju kompleksa piemaisījumi nenogulsnējas un var tikt atdalīti no ūdens šķīduma ar hloroforma ekstrakciju. Hloroforms denaturē olbaltumvielas un atvieglina ūdens un organiskās fāzes atdalīšanu. Parasti ūdens fāze formē augšējo fāzi. Tomēr, ja ūdens fāzei ir ievērojama cietība augstas sāļu (>0.5 M) koncentrācijas dēļ, tā var izveidot apakšējp fāzi. Vēl nukleīnskābes var būt tendētas uz pārviedošanos organiskajā fāzē, ja ūdens šķīduma pH nebija nodrošināts līdz atzīmei pH 7,8 – 8,0.
Ja nepieciešams, hloroforma ekstrakciju atkārto divas vai trīs reizes, lai pilnībā atdalītu netīrumus no ūdens slāņa. Lai iegūtu labāko rezultātu, organisko fāzi var atkārtoti ekstrahēt ar ūdens šķīdumu, kuru sekojoši var pievienot pie pirmā ekstrakta. Kad nukleīnskābju komplekss ir attīrīts, var veikt procedūras noslēdzošo stadiju – nogulsnēšanu.

1.4.3. DNS nogulsnēšana
Noslēdzošajā etapā nukleīnskābes atbrīvo no deterģenta. Šim mērķim ūdens šķīdumu sākumā apstrādā ar šķīdumu priekš nogulsnēšanas, ko veido CTAB maisījums ar augstas koncentrācijas NaCl (>0,8 M NaCl). Sāls ir nepieciešama priekš nukleīnskābju nogulsnēšanas. Nātrija acetāts būtu ieteicamāks nekā NaCl tā bufera īpašību dēļ. Šādos apstākļos deterģents, kurš labāk šķīst spirtā nekā ūdenī, var tikt attīrīts tajā laikā, kad nogulsnēsies nukleīnskābes. Sekojošā apstrāde ar 70% etanolu ļauj veikt papildus attīrīšanu vai arī nukleīnskābju atmazgāšanu no sāls paliekām.

Autora komentārsAtvērt
Darbu komplekts:
IZDEVĪGI pirkt komplektā ietaupīsi −7,20 €
Materiālu komplekts Nr. 1327815
Parādīt vairāk līdzīgos ...

Nosūtīt darbu e-pastā

Tavs vārds:

E-pasta adrese, uz kuru nosūtīt darba saiti:

Sveiks!
{Tavs vārds} iesaka Tev apskatīties interneta bibliotēkas Atlants.lv darbu par tēmu „Augu kallusu DNS izdalīšana un metilēšana”.

Saite uz darbu:
https://www.atlants.lv/w/640500

Sūtīt

E-pasts ir nosūtīts.

Izvēlies autorizēšanās veidu

E-pasts + parole

E-pasts + parole

Norādīta nepareiza e-pasta adrese vai parole!
Ienākt

Aizmirsi paroli?

Draugiem.pase
Facebook
Twitter

Neesi reģistrējies?

Reģistrējies un saņem bez maksas!

Lai saņemtu bezmaksas darbus no Atlants.lv, ir nepieciešams reģistrēties. Tas ir vienkārši un aizņems vien dažas sekundes.

Ja Tu jau esi reģistrējies, vari vienkārši un varēsi saņemt bezmaksas darbus.

Atcelt Reģistrēties