-
CpG oligonukleotīdu pakošana hepatīta C vīrusa nestrukturālā proteīna trīs epitopus saturošajās vīrusveidīgajās daļiņās
Novērtēts!Diplomdarbs49 Anatomija, veselība, medicīna, higiēna, Bioloģija
| Nr. | Sadaļas nosaukums | Lpp. |
| IEVADS | 5 | |
| 1. | LITERATŪRAS APSKATS | 6 |
| 2. | MATERIĀLI UN METODES | 20 |
| 3. | REZULTĀTI | 34 |
| 4. | DISKUSIJA | 48 |
| 5. | Secinājumi | 52 |
| 6. | Pateicības | 53 |
| 7. | LITERATŪRAS SARAKSTS | 54 |
Rezultātā izveidojās vīrusveidīgas daļiņas, kuras inducēja spēcīgu antivielu atbildi. Insercijas MIR rajonā tiek izmantotas konstrukcijās, kas var būt vakcīnu kandidāti pret infekcijas slimībām, ko izraisa intracelulāi parazīti. Lai izveidotu vakcīnu pret malāriju, HBc proteīna MIR rajonā ievietoja „circumsporozoite” proteīnu, kurš atkārtoja Plasmodium falciparum, Plasmodium berghei un Plasmodium yoelli epitopus. Peļu imunizācija ar attīrītām himerām daļiņām deva ne tikai specifisku B un T šūnu atbildi, bet arī izrādīja aizsardzību pret Plasmodium berghei infekciju. Teļu teileriozes vīrusa virsmas antigēna C-gala segments (SPAG-1) tika ekspresēts kā MIR inserts. Himērās daļiņas ne tikai inducēja augstus neitralizējošu antivielu titrus un T-šūnu atbildi, bet arī izrādīja aizsardzību pret sporozītu. Terapetiskās vakcīnas izveidei pret cilvēka papilomas vīrusu 16, MIR rajonā tika ievietoti B, T šūnu un CTL epitopi no cilvēka papilomas vīrusa E7 onkoproteīna. Humorālā un T šūnu atbilde bija pozitīva, bet himerās daļiņas neizraisīja tiešu CTL atbildi pret E7 proteīnu pelēs.
Pilna garuma HBc vektoru C-galā tiek ievietoti dažādi fragmenti, piem., HBV preS, HIV-1 gp41, pērtiķu imunodeficīta vīrusa Env, žurku citomegalovīrusa pp89 proteīna epitops, kurš izraisa CTL atbildi un citi. Vektori ar HBc C-gala insecijām nodrošina augstu rekombinanto proteīnu sintēzes līmeni un pašsavākšanās spējas, un izsauc specifisku imūno atbildi pret tajos ievietotiem epitopiem. HCV kora proteīns arī tiek izmantots kā HBc C-gala inserts. …
Hepatīta C vīruss tika atklāts 1989. gadā. Hepatīta C vīruss ir hroniskā hepatīta un aknu cirozes galvenais rašanās cēlonis, un aptuveni 170 miljoni cilvēku ir inficēti ar šo vīrusu visā pasaulē. Akūto un hronisko HCV infekciju biežums Latvijā pieaug katru gadu par 5 – 15%. Pret hepatīta C vīrusu nav vakcīnas, tāpēc tiek veikti pētījumi tās izstrādei. Šajā pētījumā tika izmantoti hepatīta C vīrusa nestrukturālā proteīna 3 fragmenti. Kā nesējs darbā tika izmantots hepatīta B vīrusa kora proteīns, jo tas spēj savākties vīrusveidīgās daļiņās un pieļauj dažādas modifikācijas neizjaucot tā augsti organizēto struktūru, kā arī spēj pakot nukleīnskābi. Izveidotās vīrusveidīgās daļiņas tika attīrītas ar gēlfiltrācijas un jonapmaiņas hromatofrāfijām un tajās tika iepakoti CpG oligonukleotīdi, kas kalpo kā adjuvants, ar nolūku panākt ne tikai antivielu imūno atbildi, bet arī T šūnu reakciju. Tālāk proteīnus ir plānots izmantot imunoloģiskiem pētījumiem peļu modelī. Atslēgas vārdi – hepatīta C vīruss, nestrukturālais proteīns 3, CpG oligonukleotīdi, hepatīta B vīrusa kora proteīns, vīrusveidīgas daļiņas.
Pielikuma nav.
